一、背景
一次成功的血清分離,是指血清析出呈淡黃色半透明的液態(tài),血清未見凝固現(xiàn)象,血細胞凝固成團塊狀。
對于某些場區(qū)采血過程中存在的問題,考慮到不同場區(qū)現(xiàn)場的氣候及其他條件,為了規(guī)范現(xiàn)場采血操作,為雞群疫病的監(jiān)測凈化提供合格的血清樣品,特制定了場區(qū)采血操作標準。
二、所需物品
5ml注射器、酒精棉球、干棉球、37℃恒溫箱或水浴鍋、4℃冰箱、適宜的血樣盒、1.5ml離心管、記號筆、自封袋、冰袋、泡沫保藏箱等。
三、操作規(guī)程
1、準備工作:拆去5ml注射器的外包裝,37℃恒溫箱或空調(diào)房預溫到25℃以上,制作適宜的血樣盒等;
2、確定采樣群體,數(shù)量要體現(xiàn)出代表性,上中下、前中后、左右架次代表性地定籠采樣;
3、兩人配合,一人抓雞,一人采血;
4、抓雞人將雞固定,右手握緊雞腿關(guān)節(jié)處,左手固定背部頭部;
5、采血人拔掉雞翅關(guān)節(jié)處(三角區(qū))的少量羽毛,暴露采血部位并用酒精棉球擦拭消毒,翅靜脈進針,每只雞采血3ml,干棉球按壓片刻,注射器拉大至5ml處,做好標記后,傾斜30°放置于血樣盒中,避免劇烈搖晃(該步驟中是否使用酒精棉消毒+干棉球按壓根據(jù)種雞群的情況以及采血頻率而定);
6、將血液樣品盡早放置于37℃恒溫箱或水浴鍋中,12h或過夜(視情況而定,如果中間血清已完全析出,可提前進入下一步),如果放在水浴鍋內(nèi),要避免進水污染;
7、待血細胞凝固后,小心將血清打到1.5ml離心管中,做好標記,放入自封袋,將信息填寫完整后,3天之內(nèi)送檢的置于4℃冰箱,超過3天才能送檢的置于-20℃冰箱;
8、將血清樣品放入含有適量冰袋的泡沫保藏箱,固定好密封,送檢,須提前通知化驗室。
四、注意事項
1、鑒于老齡雞的脂質(zhì)血因素,可考慮斷料,自由飲水;
2、血清樣本的最低限量是0.5ml,如果場區(qū)化驗室和總部化驗室都需要檢測,則采集血清共1ml,分裝成0.5ml即可;
3、采血完畢,盡快放置于37℃恒溫箱中,避免在外界放置時間過長,特別是低溫環(huán)境中;
4、37℃恒溫箱中放置的時間長短,小日齡雞群會短一些、快一些,大日齡雞群時間會較長;
5、考慮到血清凝固、溶血等因素,可以適當多采樣幾份;
6、避免血清樣品反復凍融。
五、記錄表格